Вступ до ПЛР -машин

ПЛР -машина , також відома як прилад ампліфікації генів ПЛР, інструмент ампліфікації ПЛР, інструмент ампліфікації нуклеїнової кислоти полімеразної ланцюгової реакції, є інструментом, який підсилює специфічну ДНК за допомогою технології ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція). Машина ПЛР широко використовується в медичних та біологічних лабораторіях, наприклад, для визначення того, чи буде тестовий орган демонструвати машини ПЛР широко застосовуються в медичних та біологічних лабораторіях, наприклад, для визначення того, чи є тестовий організм профілю генетичного захворювання, для діагностики інфекційних захворювань, для копіювання генів та визначення батьківства. Що таке ПЛР -машина?

Ось список вмісту:

l Основна структура ПЛР машини

l Принцип роботи ПЛР машини

l Кінетика реакційних машин ПЛР

Основна структура ПЛР -машини

Машина ПЛР зазвичай складається з частини гарячої кришки, частини теплового циклу, частини передачі, контрольної частини та частини живлення тощо.

Принцип роботи ПЛР машини

Принцип робочої машини ПЛР аналогічний процесу природного реплікації ДНК, специфічність якої залежить від олігонуклеотидних праймерів, доповнюючих обох кінців цільової послідовності, і складається з трьох основних етапів реакції: денатурація-оформлення-розширення.

1. Денатурація шаблону ДНК

ДНК шаблону нагрівають приблизно до 93 ° С протягом певного часу для розмежування дволанцюжкової ДНК шаблону або дволанцюгової ДНК, утвореної ПЛР-машиною, щоб зробити її одноланцюговою, щоб вона могла зв'язуватися з праймерами, готуючись до наступного раунду реакції.

2. Відпал (денатурація) шаблону ДНК та праймерів

Після того, як шаблон ДНК денатурується в одноланцюгове нагрівання, температура знижується приблизно до 55 ° С, а праймери поєднуються і пов'язані з одноланцюговою додатковою послідовністю ДНК шаблону.

3. Розширення праймерів

Кон'югат шаблону ДНК синтезується під дією TaqDNA полімерази, використовуючи DNTP як реакційну матеріал та цільову послідовність як шаблон, щоб синтезувати нову напівзбережену реплікуючу нитку, що доповнює шаблон ДНК згідно з принципом основи, що підтримує базу, та семіїсованого реплікації.

Повторюючи процес денатурації-оформлення-розширення, можна отримати більше 'напівзроблені копіючі ланцюги ', і ці нові ланцюги можуть бути використані як шаблони для наступного циклу.

Машина ПЛР на завершення кожного циклу, і так неодноразово, ДНК, що виробляється в кожному циклі, може стати шаблоном для наступного циклу, і кожен цикл підсилює кількість копії, специфічної ДНК, між двома синтетичними праймерами в 1 рази, і продукт PCR-машини швидко підсилює в експоненції 2-ї форми (2 ~ 3 години) 109 разів після 25 ~ 30 раундів (2 ~ 3 години), і на практиці він, як правило, може досягати 106 ~ 107 разів.

Реакційна кінетика машини ПЛР

Три етапи реакції машини ПЛР повторюються, що призводить до експоненціального збільшення кількості ампліфікації ДНК. Кінцева ампліфікація ДНК реакції можна обчислити за допомогою y = (1+x) n. Y являє собою кількість копій ампліфікованого фрагмента ДНК, x являє собою середню ефективність ампліфікації на ампліфікацію, а n - кількість циклів. Теоретичне значення середньої ефективності ампліфікації становить 100%, але на ранній стадії фактичної реакції збільшення фрагмента ДНК цільової послідовності є експоненціальним, а при поступовому накопиченні продуктів ПЛР -машини ампліфікований фрагмент ДНК вже не збільшується в експоненціальному масштабі, але входить у лінійний період росту або стаціонарний період, що становить середній показник ”reconnation effect ', SO, що є ефективним ефектом '. Ефективність ПЛР -машини не досягає теоретичної цінності.

Bioteke Корпорація, яка зосереджена на молекулярній діагностиці та швидкому виявленні, зокрема, на екстракції нуклеїнової кислоти, є професійним високотехнологічним виробником та ПЛР машинами. Він встановлений у місті Вусі, провінція Цзянсу, Китай. Отже, ми з нетерпінням чекаємо співпраці з вами.